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脾臟是機(jī)體重要的免疫器官之一，含有大量的淋巴細(xì)胞，占全身淋巴組織總量的25%，在小鼠中，由于小鼠血液量少，從外周血液中分離大量淋巴細(xì)胞較為困難，故經(jīng)常需要從其脾臟中獲取大量的淋巴細(xì)胞。不久前，來(lái)自華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院的李老師在Biomaterials雜志上發(fā)布的文章中就用到了上述實(shí)驗(yàn)。以下為是李老師分享的一些相關(guān)經(jīng)驗(yàn)。操作步驟1材料準(zhǔn)備選取具有正常免疫功能的成年小鼠（所需的小鼠數(shù)量根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要決定，通常一只小鼠脾臟可提取的淋巴細(xì)胞數(shù)量為2~6×107），快速斷頸...

近年來(lái)，合成生物學(xué)的研究如火如荼地開展，其目的在于構(gòu)建人工分子生物系統(tǒng)并執(zhí)行定制的功能。來(lái)自湖南大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)使用DNA分子反應(yīng)網(wǎng)絡(luò)封裝在原生細(xì)胞中，以此構(gòu)建了一種可以持續(xù)處理生物環(huán)境中波動(dòng)生物信息的分子CPU（mCPU），該研究成果發(fā)表于國(guó)際期刊ScienceAdvances（IF=14.96）。原生細(xì)胞（protocell）的合成是該領(lǐng)域的一大挑戰(zhàn)，下文為此研究團(tuán)隊(duì)中的王老師分享的一些相關(guān)經(jīng)驗(yàn)。1合成原理“原生細(xì)胞的特點(diǎn)是含有微米級(jí)大小的空腔和外部的雙層磷脂膜。本論文采用...

肝細(xì)胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）是近年來(lái)發(fā)病率急劇上升的惡性腫瘤之一。肝癌細(xì)胞系廣泛應(yīng)用于各類肝癌的研究。肝癌細(xì)胞系的基因組與健康人細(xì)胞系的基因組不同。常見的人肝癌細(xì)胞系有PLC、Huh7、Huh7.5、Hep3B、HepG2、SMMC-7721、MHCC97-H、MHCC9-L等，每一種細(xì)胞系都有自己的特點(diǎn)，由于它們具有與原代肝癌細(xì)胞相似的生物學(xué)特性，無(wú)生物學(xué)改變、特性穩(wěn)定、無(wú)限制傳代，為肝癌研究提供了理想的體外模型，成為除動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外肝癌疾...

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)原代細(xì)胞培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)，是將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出，經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖。原代培養(yǎng)的基本過(guò)程包括取材、培養(yǎng)材料的制備、接種及培養(yǎng)等步驟，原代培養(yǎng)的方法很多，基本和常用的是組織塊培養(yǎng)法和分離細(xì)胞法。1、組織塊培養(yǎng)法基本操作過(guò)程1)用培養(yǎng)液濕潤(rùn)所取組織材料，并用鋒利的眼科剪將附在其上的脂肪和結(jié)締組織去除干凈。再用平衡液(PBS)或Han...

6、24、96孔板接種和換液?jiǎn)栴}細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等，孔的底部可以選擇平的、圓的，或錐形的，這取決于細(xì)胞類型和下游應(yīng)用。對(duì)于傳統(tǒng)的2D細(xì)胞培養(yǎng)(如HeLa或MDCK細(xì)胞)，特別是需要對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行成像或分光光度測(cè)定，通常選平底(F-bottom)。對(duì)于不存在接觸抑制的細(xì)胞，弧形底(C-bottom)也不錯(cuò)。圓底(U-bottom)適合懸浮培養(yǎng)(如球體細(xì)胞培養(yǎng))，因?yàn)閳A的表面讓細(xì)胞難以附著和生長(zhǎng)。而錐形底很少用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，但...

細(xì)胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細(xì)胞的一種常用和重要的工具，依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型)；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板，形狀、規(guī)格、用途多樣，那么如何選擇適合的培養(yǎng)板?培養(yǎng)板的選擇1.細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型)不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞，通常是選用平底的，這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí)，無(wú)論是貼壁和...

當(dāng)我們需要運(yùn)輸或者長(zhǎng)期不用某種細(xì)胞時(shí)，通常會(huì)使用凍存的方法來(lái)保存。若未做好細(xì)胞凍存，還會(huì)直接影響后續(xù)細(xì)胞復(fù)蘇狀態(tài)，所以細(xì)胞凍存的重要性不容小覷。本期信裕細(xì)胞學(xué)堂將帶來(lái)貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞的凍存操作步驟及注意事項(xiàng)，以便大家查漏補(bǔ)缺。在進(jìn)行凍存操作前，可預(yù)先配置好凍存液；若使用無(wú)血清非程序凍存液，則無(wú)需自己配制，也無(wú)需使用程序降溫盒。01貼壁細(xì)胞凍存操作◆將待操作的細(xì)胞去上清，用PBS潤(rùn)洗；◆去上清，加入胰酶消化，消化完成后加入completely培養(yǎng)基終止消化，并吹打均勻制備成細(xì)...

2017年是CAR-T細(xì)胞療法的元年，使得越來(lái)越多的人開始關(guān)注細(xì)胞治療領(lǐng)域，包括干細(xì)胞治療、TCR-T療法等等。幾乎所有的細(xì)胞治療都有一個(gè)共同點(diǎn)，即都需要使用細(xì)胞因子來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞增殖或分化。細(xì)胞因子雖然在細(xì)胞中含量很少，但是種類豐富，并且是作用廣泛，那么，到底什么是細(xì)胞因子?細(xì)胞因子的作用是什么?怎么選擇合適的細(xì)胞因子?我們一起來(lái)看看。什么是細(xì)胞因子?為了維持機(jī)體的生理平衡，抵抗病原微生物的侵襲，防止腫瘤發(fā)生，機(jī)體的許多細(xì)胞，特別是免疫細(xì)胞合成和分泌許多種微量的小分子量可溶性蛋...

首先，我們來(lái)了解下動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)什么是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理是細(xì)胞增殖。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶），放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。細(xì)胞培養(yǎng)是指細(xì)胞在體外條件下的生長(zhǎng)，動(dòng)物細(xì)胞在單獨(dú)細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中不再形成個(gè)體。體外細(xì)胞培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如，需要糖、...

眾所周zhi，多細(xì)胞生物在發(fā)育過(guò)程中，存在著多種預(yù)定的、受到精確控制的細(xì)胞程序性死亡，例如細(xì)胞凋亡（Apoptosis）、程序性壞死（Necroptosis）、細(xì)胞焦亡（Pyroptosis），以及鐵死亡（Ferroptosis）等。就在近日，2022年3月17日，哈佛-MIT博德研究所的研究人員在國(guó)際頂尖學(xué)術(shù)期刊Science上發(fā)表了題為：CopperinducescelldeathbytargetinglipoylatedTCAcycleproteins的研究論文。Tod...